تهیه یک غذای پتری رسانه ای غنی سازی یک مهارت اساسی در میکروبیولوژی است که برای کشت و مطالعه میکروارگانیسم های مختلف ضروری است. من به عنوان یک تأمین کننده ظرف پتری ، اهمیت ارائه محصولات با کیفیت بالا و به اشتراک گذاری دانش مربوطه را درک می کنم. در این وبلاگ ، من شما را از طریق فرآیند تهیه یک غذای رسانه ای غنی سازی پتری گام به گام راهنمایی می کنم.
درک رسانه غنی سازی
رسانه های غنی سازی برای تشویق رشد میکروارگانیسم های خاص ضمن سرکوب رشد دیگران ، تدوین می شوند. آنها حاوی مواد مغذی ، فاکتورهای رشد و عوامل انتخابی هستند که از ارگانیسم های هدف حمایت می کنند. به عنوان مثال ، اگر شما علاقه مند به جداسازی یک فشار خاص از باکتری هایی که به یک اسید آمینه خاص نیاز دارند ، محیط غنی سازی با آن اسید آمینه تکمیل می شود.
مواد مورد نیاز
- ظروف پتری: غذاهای پتری با کیفیت بالا برای کشت موفق بسیار مهم هستند. ما طیف گسترده ای ازشیشه آزمایشگاهی 90 میلی متر 100 میلی متر 120 میلی متر ظرف پتری با دربوتظرف شیشه ای پتری ظرف 60 میلی متر 90 میلی متر 100 میلی متر ظرف کشت سلول با دربکه از شیشه ممتاز ساخته می شوند ، از شفافیت و دوام بهینه اطمینان می دهند.
- رسانه غنی سازی: بسته به میکروارگانیسم هدف ، باید رسانه غنی سازی مناسب را انتخاب کنید. شما می توانید رسانه های پیش ساخته را خریداری کرده یا آن را از ابتدا با استفاده از اجزای جداگانه تهیه کنید.
- اتوکلاو: این برای استریل کردن رسانه ها و ظروف پتری برای جلوگیری از آلودگی استفاده می شود.
- پیپت ها و نکات: برای اندازه گیری دقیق و انتقال رسانه و نمونه.
- Bunsen Burner یا منبع گرما: برای استریل کردن پیپت ها و ابزارهای دیگر در طی فرآیند.
- میز کار استریل یا هود جریان لمینار: برای حفظ یک محیط استریل هنگام کار.
مرحله - به - آماده سازی مرحله
1. رسانه غنی سازی را آماده کنید
- مؤلفه ها را وزن کنید: اگر رسانه ها را از ابتدا می سازید ، با توجه به دستور العمل ، هر مؤلفه را با دقت وزن کنید. حتما از تعادل تمیز و کالیبره شده استفاده کنید. به عنوان مثال ، اگر رسانه به 10 گرم پپتون ، 5 گرم عصاره مخمر و 2 گرم کلرید سدیم نیاز داشته باشد ، این مقادیر را دقیقاً اندازه گیری کنید.
- مؤلفه ها را حل کنید: اجزای وزنه برداری را به یک فلاسک تمیز یا لیوان منتقل کنید. آب مقطر را به فلاسک اضافه کرده و با استفاده از همزن مغناطیسی یا میله شیشه ای به آرامی هم بزنید تا تمام اجزای آن کاملاً حل شوند. در صورت لزوم مخلوط را کمی گرم کنید ، اما از گرمای بیش از حد خودداری کنید.
- pH را تنظیم کنید: از pH متر برای اندازه گیری pH رسانه استفاده کنید. بیشتر میکروارگانیسم ها در یک محدوده pH خاص به بهترین وجه رشد می کنند. به عنوان مثال ، بسیاری از باکتری ها یک pH کمی قلیایی را در حدود 7.2 - 7.4 ترجیح می دهند. pH را با اضافه کردن مقادیر کمی اسید یا پایه در صورت لزوم تنظیم کنید.
- اضافه کردن عوامل انتخابی (در صورت وجود): اگر رسانه غنی سازی برای انتخاب گروه خاصی از میکروارگانیسم ها طراحی شده است ، در این مرحله عوامل انتخابی مناسب را اضافه کنید. به عنوان مثال ، اگر می خواهید باکتری های گرم - منفی را جدا کنید ، ممکن است نمک های کریستالی یا نمک صفراوی را برای مهار رشد باکتری های گرم - مثبت اضافه کنید.
2. رسانه ها را عقیم کنید
- اتوکسیو: رسانه های آماده شده را به ظروف مناسب مانند پیچ های پیچ یا فلاسک منتقل کنید. درپوش ها را کمی شل کنید تا بخار در حین اتوکلاو فرار کند. ظروف را در اتوکلاو قرار داده و پارامترهای مناسب را تنظیم کنید. به طور کلی ، رسانه ها در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 تا 20 دقیقه اتوکلاو می شوند تا از عقیم سازی کامل اطمینان حاصل شود.
- خنک کننده: بعد از اتوکلاو ، ظروف را از اتوکلاو با دقت جدا کرده و به آنها اجازه دهید تا حدود 50 - 55 درجه سانتیگراد خنک شوند. این دما برای ریختن رسانه در ظروف پتری ایده آل است بدون اینکه بعداً آسیب حرارتی به میکروارگانیسم ها وارد شود.
3. غذاهای پتری را آماده کنید
- عقیم سازی: اگر از ظروف شیشه ای پتری ما استفاده می کنید ، آنها باید از قبل استریل شوند. با این حال ، این یک تمرین خوب است - بررسی کنید. در صورت لزوم می توانید ظروف پتری را در اتوکلاو در دمای 121 درجه سانتیگراد قرار دهید.
- فضای کاری استریل را تنظیم کنید: در یک محیط استریل مانند هود جریان لمینار یا یک میز کار استریل کار کنید. فضای کاری را با یک ضد عفونی کننده تمیز کرده و حداقل 15 دقیقه قبل از شروع کار ، چراغ UV را روشن کنید تا هرگونه آلودگی هوایی را از بین ببرید.
4. رسانه ها را درون ظروف پتری بریزید
- گردن ظرف را شعله دهید: با استفاده از یک مشعل بونسن ، به آرامی گردن ظرف را که محیط خنک شده را در خود جای داده است ، به آرامی شعله ور کنید. این امر به جلوگیری از ورود هرگونه آلودگی به رسانه هنگام ریختن آن کمک می کند.
- رسانه ها را بریزید: درب ظرف پتری را کمی باز کنید و رسانه ها را درون ظرف بریزید. هدف قرار دادن کف ظرف به طور مساوی با یک لایه از رسانه در حدود 3 - 5 میلی متر ضخامت داشته باشید. مراقب باشید رسانه ها را در خارج از ظرف نزول نکنید.
- به رسانه ها اجازه می دهد تا تحکیم دهند: پس از ریختن رسانه ها ، درب آن را دوباره روی ظرف پتری قرار دهید و بگذارید تا زمانی که رسانه ها جامد نشوند ، بدون فشار بنشیند. این بسته به نوع رسانه معمولاً حدود 15 تا 30 دقیقه طول می کشد.
5. ظروف پتری را برچسب و ذخیره کنید
- برچسب زدن: از یک نشانگر دائمی برای برچسب زدن ظروف پتری با نوع رسانه ، تاریخ آماده سازی و هرگونه اطلاعات مرتبط دیگر مانند میکروارگانیسم هدف استفاده کنید.
- انباره: غذاهای پتری آماده شده را در مکانی خنک و تاریک ذخیره کنید. برای صرفه جویی در فضا می توانید ظروف را با دقت جمع کنید. اگر بلافاصله از ظروف استفاده نمی کنید ، می توانید آنها را در 4 درجه سانتیگراد در یخچال ذخیره کنید تا ماندگاری آنها افزایش یابد.
عیب یابی
- آلودگی: اگر متوجه نشانه های آلودگی مانند رشد قارچی یا مستعمرات غیرمعمول در رسانه ها هستید ، غذاهای پتری آسیب دیده را کنار بگذارید. حتماً تکنیک های عقیم سازی خود را مرور کرده و دفعه دیگر در یک محیط استریل تر کار کنید.
- رسانه ها تحکیم نمی دهند: این می تواند به دلیل نسبت نادرست اجزای یا اتوکلاو کافی باشد. دستور العمل را بررسی کنید و مطمئن شوید که دستورالعمل های اتوکلاو را به درستی دنبال کرده اید.
- توزیع رسانه ناهموار: اگر رسانه ها به طور مساوی در ظرف پتری توزیع نشوند ، می تواند به این دلیل باشد که ظرف هنگام ریختن رسانه ها سطح آن نبود. در طی فرآیند ریختن حتما ظرف را روی یک سطح صاف قرار دهید.
پایان
تهیه یک غذای پتری رسانه ای غنی سازی یک فرایند دقیق اما با ارزش است. با دنبال کردن مراحل ذکر شده در بالا و استفاده از غذاهای پتری با کیفیت بالا از عرضه ما ، می توانید یک محیط ایده آل برای کشت و مطالعه میکروارگانیسم ها ایجاد کنید. این که آیا شما یک محقق در یک آزمایشگاه ، دانش آموز در کلاس میکروبیولوژی هستید یا شخصی که علاقه مند به فرهنگ میکروبی در خانه هستید ، داشتن ابزار و دانش مناسب ضروری است.
اگر علاقه مند به خرید غذاهای پتری با کیفیت بالا برای پروژه بعدی خود هستید ، دوست داریم از شما بشنویم. برای کسب اطلاعات بیشتر با ما تماس بگیرید و در مورد نیازهای تهیه خود صحبت کنید. تیم ما به ارائه بهترین محصولات و خدمات برای تأمین نیازهای شما اختصاص داده شده است.
منابع
- اطلس ، RM (2010). دفترچه راهنمای رسانه های میکروبیولوژیکی. مطبوعات CRC.
- Pelczar ، MJ ، Chan ، ECS ، & Krieg ، NR (2007). میکروبیولوژی: مفاهیم و برنامه ها. مک گرا - هیل.